澳门威尼克斯人:

　　师兄手中的移液器正上下翻飞，他需要从混沌悬液中提取项目的命根子——目标蛋白。师兄素有蛋白纯化神来之手的美誉，总被有心之人觊觎：

　　「三面夹击」下，师兄嘴角微扬，手中的移液器划出一道优雅的弧线，祭出破局之法：

　　「选择性耳背」——对周遭的无礼请求自动屏蔽，眼中只有离心管中那片微观宇宙。

　　「铁手结界」——起身护住关键试剂，口中轻念护身咒语：「退！退！退！」，手上步骤却行云流水，丝毫不乱。

　　师兄已优雅地将澄澈的纯蛋白液收入管中，杂蛋白在废液缸里发出无声哀嚎，他转向我，眉梢一挑：

　　与传统的蛋白质纯化方法相比，亲和纯化磁珠作为一种高效、便捷的工具，正在慢慢的变成为实验室的首选。如果您正在进行蛋白纯化实验，或者有蛋白纯化需求，即日起至 2025 年 10 月 28 日，可识别下方二维码，花 2 分钟参与纯化磁珠有奖问卷填写，有机会获得文件袋或定制笔记本！

　　操作简便：磁珠的磁性特性使得分离与回收过程变得简单高效，减少了实验操作的复杂性和时间消耗。

　　可扩展性：无论是小规模实验还是高通量筛选，亲和纯化磁珠都能轻松应对，满足多种实验需求。

　　兼容性强：适用于多种样本类型，包括细胞裂解液、血清和组织提取液，大范围的应用于基础研究、药物开发和临床诊断等领域。

　　温和混匀：在整个结合和洗涤过程中，要通过轻柔的翻转或吹打来混匀磁珠与液体。避开使用涡旋损伤蛋白或磁珠。

　　完全分离：将管子置于磁力架上后，务必静置等待溶液完全变清澈，确保所有磁珠都被磁性吸附到位后。

　　小心移液：分离后，使用移液器小心地吸弃上清液，枪头应远离聚集的磁珠。切勿采用倾倒的方式。

　　保持湿润：在整个操作的流程中，一定不可以让磁珠干燥。一旦磁珠变干，会极大地增加非特异性吸附。

　　通过使用亲和纯化磁珠，研究人员能够更快速地获取高纯度的蛋白质，为后续的功能研究和应用奠定坚实基础。默克的蛋白纯化磁珠服务是一套为现代生物学实验室设计的「精炼」工具，它通过将分离步骤极致简化，极大地提升了蛋白纯化的效率与体验，很适合在高通量、自动化、快速验证的场景下替代传统方法。

　　高效便捷：磁性特性允许快速从悬浮液中分离磁珠，结合磁力平台轻轻松松实现高通量操作

　　ANTI-FLAG® M2 亲和磁珠识别并捕获 FLAG® 肽融合蛋白，结合磁力架即可高效实现小规模的 FLAG 标签蛋白纯化和 IP 操作。

　　Anti-FLAG® M2 磁珠结合的融合蛋白可通过多种方法洗脱，包括肽竞争法、酸性法和 SDS-PAGE 上样缓冲液法。

　　用 3X FLAG® 肽洗脱时，样品需与 100～150 ng/µL FLAG 肽共同孵育 30 分钟，酸性洗脱时，与 0.1 M 甘氨酸-盐酸（pH 2.5～3.0）的孵育时间则不到 10 分钟，延长甘氨酸-盐酸的洗脱时间并不能增加蛋白洗脱量。

　　使用 SDS-PAGE 上样缓冲液洗脱的条件较为简单，但由于上样缓冲液中的 SDS 造成 M2 抗体变性，凝胶电泳出现了对应 anti-FLAG® 抗体重链和轻链的条带。

　　使用三种洗脱方法的小规模 anti-FLAG® M2 磁珠免疫沉淀实验方案

　　比较甘氨酸孵育 5 至 30 分钟范围的洗脱组分。左图：考马斯亮蓝染色凝胶。右图：ANTI-FLAG® M2 抗体的免疫印迹。

　　默克提供全面、质量卓越的纯化磁珠产品，提供高效的蛋白纯化方案，助力自动化纯化方案。其中，PureProteome™系列磁珠将蛋白/标签试剂共价偶联到顺磁性亲和介质（ 即磁珠） 上，逐渐增强了纯化介质的应用性。PureProteome™ 磁珠包括 Protein A/G 混合磁珠、抗体亚型纯化磁珠、镍磁珠等，是抗体/蛋白纯化、血清耗竭、IP、Co-IP 等应用的高效方案。

　　HIS 标签（组氨酸标签）是生物分子纯化中最常用的标签之一，由于其简便性和高特异性，HIS 标签不仅提高了纯化效率，还减少了后续处理的复杂性。然而，在分析数百个新生成的突变体时，筛选重组标签蛋白的表达也是一项具有挑战性的任务。

　　我们经过验证的自动化方案在 2.5 小时内使用镍-HIS 结合磁珠对 96 孔的细胞浆进行纯化，最终得到的 96 孔分离蛋白能够最终靠多种方法进一步分析，包括毛细管电泳（CE）、液相色谱-质谱（LC-MS）或其他高通量检测。

　　PureProteome™ 镍磁珠是自动化纯化的理想选择，因为其相比来说较高的结合能力（1～5 µg 蛋白/mL 珠悬液）和耐用的珠类型（硅珠）。将这些珠与裂解溶液如 CelLytic™ B 试剂或 BugBuster® 主混合物结合，可以创建高效的裂解和捕获方法，很适合由 Opentrons® 驱动的 AAW™ 系统。

　　PureProteome™ 用户指南方案已被编为 Python 代码，经过测试并通过 Millipore® 应用库提供下载。一旦下载到仪器上，它能够适用于执行所有液体处理步骤，包括一步裂解和捕获、三次洗涤和两次洗脱步骤，以及所有摇动和磁性分离操作。

　　手工方法和 AAW™ 方法的产量对比：同时展示了用于大肠杆菌表达的两个构建体，P0A710 和 P0A749。